癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选

	癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选
	曾家豫1 ; 万波 1; 马瑾 2; 袁红霞 2; 李星 1; 赵运旺 1; 廖世奇 2
	2015-06-15
发表期刊	南京医科大学学报(自然科学版)
ISSN	1007-4368
卷号	0 期号:2015-06 页码:782-786
摘要	目的 :筛选癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)特异性单克隆抗体(Anti-CEA)的核酸适配体(aptamers),为肺癌血清肿瘤标志物核酸适配体的筛选奠定实验基础。方法:利用羧基化琼脂磁珠作为筛选介质,以Anti-CEA为筛选的目标靶分子,通过消减SELEX技术及实时定量PCR技术,从随机ss DNA文库中筛选出与Anti-CEA特异性结合的aptamers,并通过凝胶阻滞实验(EMSA)鉴定筛选到的Anti-CEA-aptamer复合物,然后将得到的第10轮富集文库扩增为双链DNA,通过切胶纯化后,连接PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,同时利用交错PCR技术鉴定阳性克隆,经测序,获得aptamers的序列。结果:经过10轮筛选得到了4条与Anti-CEA结合的aptamers,测序结果显示均为不同序列。结论:验证筛选出的与Anti-CEA结合的aptamer,特异性检测结果表明2号aptamer与靶分子结合的特异性很高,且与非特异蛋白无明显吸附,筛选出的aptamers用于识别Anti-CEA,将为肺癌的早期诊断和早期治疗提供新的突破口。
关键词	消减SELEX技术羧基琼脂磁珠 CEA特异性单克隆抗体核酸适配体肺癌
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收录类别	CNKI ; 北大核心 ; CSCD
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
中图分类号	R392-33
自定义期刊	CSSCI核心
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://ir.nwnu.edu.cn/handle/39RV6HYL/11311
专题	实体学院_生命科学学院
作者单位	1.西北师范大学生命科学学院; 2.甘肃省医学科学研究院分子生物中心
第一作者单位	生命科学学院
第一作者的第一单位	生命科学学院
推荐引用方式 GB/T 7714	曾家豫,万波,马瑾,等. 癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2015,0(2015-06):782-786.
APA	曾家豫.,万波.,马瑾.,袁红霞.,李星.,...&廖世奇.(2015).癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选.南京医科大学学报(自然科学版),0(2015-06),782-786.
MLA	曾家豫,et al."癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CEA)核酸适配体的筛选".南京医科大学学报(自然科学版) 0.2015-06(2015):782-786.

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癌胚抗原特异性单克隆抗体(Anti-CE（387KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载
癌胚抗原特异性单克隆抗体（Anti-CE（388KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载